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【DOC】FDA金黃色葡萄球菌檢測方法 - 醫學(xué)資源下載
資源作者：沙漠雪狼
資源分類(lèi)：藥物 - 臨床藥學(xué)
資源屬性：文檔
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上傳日期：2012-12-27 09:27:17

FDA金黃色葡萄球菌檢測方法 黃色葡萄球菌—概述根據《伯杰氏鑒定細菌學(xué)手冊》，按葡萄球菌的生理化學(xué)組成，將葡萄球菌分為金黃色葡萄球菌(Staphylococcus?aureus)、表皮葡萄球菌(S.?epidermidis)和腐生葡萄球菌(S.?saprophyticus)，其中金葡多為致病性菌，表葡偶爾致病。金黃色葡萄球菌是人類(lèi)化膿性感染中最常見(jiàn)的病原菌?？梢鹁植炕撔愿腥?，如癤、癰、皮下膿腫、外科切口及燒傷創(chuàng )面的感染；也可引起肺炎、偽膜性腸炎、腎盂腎炎、心包炎等多系統的化膿性感染；還可引起敗血癥、膿毒癥等全身性感染。葡萄球菌的致病力強弱主要取決于其產(chǎn)生的毒素和侵襲性酶。??金黃色葡萄球菌—生物學(xué)特性金黃色葡萄球菌呈球形，直徑0.8μm左右，排列成葡萄串狀?，無(wú)芽孢，無(wú)莢膜。金黃色葡萄球菌—生長(cháng)特性金黃色葡萄球菌在肉湯中呈渾濁生長(cháng)，在胰酪胨大豆肉湯內有時(shí)液體澄清，菌量多時(shí)呈渾濁生長(cháng)。金黃色葡萄球菌檢驗—方法適用性MPN法：適用于檢測帶有大量競爭菌的食品及其原料和未經(jīng)處理的含少量金黃色葡萄球菌的食品。直接平板計數法：適用于檢查金黃色葡萄球菌數不小于10/g（ml）的食品。增菌培養法：適用于檢查含有受損傷的金黃色葡萄球菌的加工食品。?????????????金黃色葡萄球菌檢驗——直接平板計數法???????????????????（FDA?BAM?&ISO）1.檢樣（50g+450mL稀釋液）2.?適當十倍稀釋樣品3.選擇2~3個(gè)連續適宜稀釋度4.吸取1ml菌液按照0.3mL、0.3mL、0.4mL分別涂布于3塊90mmBaird-Parker平板上（做平行試驗）?????FDA金黃色葡萄球菌檢測方法 ??35℃?，45~48?h5.確證試驗報告FDA?BAM?金黃色葡萄球菌檢驗—MPN法1.檢樣（50g+450mL稀釋液）2.適當十倍稀釋樣品3.選擇3個(gè)適宜的連續稀釋度的樣品稀釋液，每個(gè)稀釋度接種三管10%?NaCl?TSB肉湯，每管接種1mL?????????????35℃?，48?±2?h4.從生長(cháng)的管中接種1環(huán)劃線(xiàn)于?Baird-Parker平板上?????????35℃?，48?h5.確證試驗6.報告FDA?BAM?金黃色葡萄球菌確證試驗1.凝固酶試驗方法：從平板上至少挑取1個(gè)可疑金黃色葡萄球菌菌落，移種到TSB/BHI肉湯中，置35℃培養18-24h。取肉湯培養物0.3mL同0.5mL凝固酶試驗兔血漿充分混合，置35℃培養，定時(shí)觀(guān)察是否有凝塊形成，至少觀(guān)察6h。試驗中需同時(shí)做已知陽(yáng)性和陰性對照。結果判定：以?xún)热菸锿耆?，使試管倒置或傾斜時(shí)不流動(dòng)為陽(yáng)性。部分凝固（2+和3+）的必須進(jìn)行生化鑒定加以證實(shí)。 FDA金黃色葡萄球菌檢測方法 FDA?BAM金黃色葡萄球菌確證試驗2.革蘭氏染色對所有的可疑培養物都要進(jìn)行革蘭氏染色。3.生化鑒定 過(guò)氧化氫酶試驗 葡萄糖厭氧利用試驗 甘露醇厭氧利用試驗 金葡溶菌酶敏感性試驗 耐熱核酸酶試驗（輔助）ISO?金黃色葡萄球菌檢驗—MPN法1.檢樣（xg+9xmL稀釋液）2.適當十倍稀釋樣品3.選擇3個(gè)適宜的連續稀釋度的樣品稀釋液，每個(gè)稀釋度接種三管modified?Giolitti?and?Cantoni?broth，????? ?????????????37℃?，24~48?h4.從變黑或出現黑色沉淀的管中接種1環(huán)培養物于?Baird-Parker平板上???????????????37℃?，48?h5.確證試驗6.報告 FDA金黃色葡萄球菌檢測方法

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